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浅谈组培中培养物的不良表现、可能原因及改进措施

浅谈组培中培养物的不良表现、可能原因及改进措施
  初代培养阶段:启动与脱分化
不良表现:培养物水浸状、变色、坏死、茎断面附近干枯
可能原因:表面灭菌剂过烈,时间过长;外植体选用部位不当;时期不当;
改进措施:试用较温和的灭菌剂,降低浓度,减少时间。试用其他部位;改在生长初、中期采样。
不良表现:培养物长期培养没有多少反应
可能原因:生长素种类不当;用量不足;温度不适宜;培养基不适宜
改进措施:增加生长素用量,试用2,4-D;调整培养温度
不良表现:愈伤组织生长过旺,疏松,后期水浸状
可能原因:生长素及细胞分裂素用量过多;培养温度过高;培养基渗透势低
改进措施:减少生长素、细胞分裂素用量,适当降低培养温度
不良表现:愈伤组织生长过紧密、平滑或突起,粗厚,生长缓慢
可能原因:细胞分裂素用量过多;糖浓度过高;
改进措施:适当减少细胞分裂素和糖的用量
不良表现:侧芽不萌发,皮层过于膨大,皮孔长出愈伤组织
可能原因:采样枝条过嫩;生长素、细胞分裂素用量过多
改进措施:减少生长素、细胞分裂素用量,采用较老的枝条
继代培养阶段:再分化与丛生芽苗增殖
不良表现:苗分化数量少,速度慢,分枝少,个别苗生长细高
可能原因:细胞分裂素用量不足;温度偏高;光照不足;
改进措施:增加细胞分裂素用量,适当降低温度,增加光照时间
不良表现:苗分化较多,生长慢,部分苗畸形,节间极度短缩,苗丛密集,过度微型化
可能原因:细胞分裂素用量过多,温度不适宜
改进措施:减少或停用一段时间细胞分裂素,调节适当温度
不良表现:分化出苗较少,苗畸形,培养较久的苗可能再次愈伤组织化
可能原因:生长素用量偏高,温度偏高
改进措施:减少生长素用量,适当降温
不良表现:叶粗厚变脆
可能原因:生长素用量偏高,或兼有细胞分裂素用量偏高
改进措施:适当减少激素用量,避免叶接触培养基
不良表现:再生苗的叶缘、叶面等处偶有不定芽分化出来
可能原因:细胞分裂素用量过多,亦或该种植物适宜这种再生方式
改进措施:适当减少细胞分裂素用量,或分阶段利用利用这一再生方式
不良表现:丛生苗过于细弱,不适宜生根操作和将来移栽
可能原因:细胞分裂素用量过多,温度过高,光照短,光强不足,久不转接,生长空间窄
改进措施:减少细胞分裂素用量,延长光照,增加光强,及时转接继代培养,降低接种密度,改善瓶口遮蔽物
不良表现:常有黄叶、死苗夹于丛生苗中,部分苗逐渐衰弱,生长停止,草本植物有时水浸状、烫伤状
可能原因:瓶内气体状况恶化,pH值变化过大;久不转接,糖已耗尽,光合作用不足以维持自身;瓶内乙烯含量升高;培养物可能已经污染,温度不适
改进措施:部分措施同上,去除污染,控制温度
不良表现:幼苗生长无力,陆续发黄落叶,组织水浸状、煮熟状
可能原因:部分原因同上;植物激素配比不适,无机盐浓度不适等
改进措施:部分措施同上,及时继代培养,适当调节激素配比
不良表现:幼苗淡绿,部分失绿
可能原因:忘记加铁盐或者量不足;pH值不适,铁、锰、镁元素配比失调,光过强,温度不适
改进措施:仔细配制培养基,注意配方成分,调好pH值,控制光温条件
诱导生根阶段
不良表现:培养物久不生根,基部切口没有适宜的愈伤组织生长
可能原因:生长素种类不适宜;用量不足;生根部位通气不良;基因型影响,生根程序不适当,pH值不适;无机盐浓度及配比不当等
改进措施:改进培养程序,选用货增加生长素用量,改用滤纸桥液培生根
不良表现:愈伤组织生长过大过快,根部肿胀或畸形,几条根并联货愈合;苗发黄,受抑制或死亡
可能原因:生长素种类不适,用量过高;或伴有细胞分裂素用量过高,程序不适等
改进措施:减少生长素或细胞分裂素用量,改进培养程序等
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